Covance ahora se llama Labcorp Drug Development

Somos una compañía global que innova para millones —juntos—, y seguimos trayéndole más avances médicos superiores.

Más información

C1498: un modelo murino para leucemia mielógena aguda (LMA)

Author: Dylan Daniel, PhD, Director, Scientific Development
Date: April 2017


La leucemia mielógena aguda (LMA) es un cáncer de los glóbulos blancos mieloides de rápida progresión. Se calcula que en el 2017 habrá 21.380 nuevos casos de LMA y 10.590 fallecidos por esta enfermedad. La LMA aparece por la proliferación excesiva de leucocitos mieloides diferenciados o no diferenciados, inicialmente en la médula ósea. A medida que la enfermedad avanza, los blastocitos LMA aparecen en la sangre y otros órganos linfoides secundarios. Cuando las células de LMA proliferan, suprimen la hematopoyesis normal en la médula ósea y aparecen síntomas como anemia y leucopenia. La LMA está caracterizada por una compleja variedad de subtipos definidos por alteraciones genómicas y perfiles de expresión génica. El tratamiento normalmente incluye quimioterapia intensiva seguida por un trasplante de médula ósea (TMO) alogénico en los pacientes que pueden tolerar estas terapias. Para los pacientes mayores con LMA suelen usarse opciones de tratamiento menos debilitantes, entre ellas inmunoterapia, ya que muchas veces no pueden tolerar una quimoterapia intensiva o TMO.

C1498 is a murine AML cell line that arose spontaneously in a C57BL/6 mouse and grows aggressively in syngeneic mice. Our C1498 line has been luciferase- and mCherry-enabled to permit monitoring of whole body tumor growth by bioluminescence imaging (BLI) and quantification of tumor burden in isolated tissues by flow cytometry, respectively. En la implantación intravenosa de C1498-luc-mCherry en ratones C57BL/6 singeneicos se observa un crecimiento progresivo de las células mediante el monitoreo con BLI (imagen 1A) con señales evidentes en los huesos largos (médula ósea) y otros sitios diseminados durante la evolución de la enfermedad (imagen 1B).

Cinética de crecimiento e imágenes de BLI representativas

Imagen 1A: Cinética de crecimiento de C1498-luc-mCherry en ratones C57BL/6 mediante BLI.
Imagen 1B: Imágenes de BLI representantivas de carga tumoral del C1498-luc-mCherry en ratones sin tratar.

Imagen 1A: Cinética de crecimiento de C1498-luc-mCherry en ratones C57BL/6 mediante BLI.

Imagen 1B: Imágenes de BLI representantivas de carga tumoral del C1498-luc-mCherry en ratones sin tratar.

En cuanto a cinética de supervivencia (morbilidad/mortalidad) (imagen 2A), se observó una supervivencia promedio de aproximadamente 23 días; no obstante, los ratones no presentaron ninguna pérdida de peso durante el transcurso de la evolución de la enfermedad (imagen 2B).

Cinética de supervivencia y cambio en peso corporal

Imagen 2: cinética de supervivencia (A) y cambio en peso corporal (B) de ratones C57BL/6 con LMS C1498-luc-mCherry diseminada.

Imagen 2: cinética de supervivencia (A) y cambio en peso corporal (B) de ratones C57BL/6 con LMS C1498-luc-mCherry diseminada.

La carga tumoral macroscópica se evaluó al momento de la necropsia (cuadro 1). Los sitios con mayor prevalencia de tumores macroscópicos fueron el hígado, los ganglios linfáticos, los ovarios y la columna vertebral. Al usar la expresión mCherry en la línea C1498, la carga tumoral en tejidos se puede analizar por citometría de flujo al momento de la necropsia del animal. En la imagen 3 se muestra un esquema de gating representativo para cuantificar células de LMA mCherry+ de ganglios linfátidos. En el día 21, la carga tumoral de LMA como porcentaje de células totales en ganglios linfáticos, ovarios e hígado es bastante grande (cuadro 2).

Cuadro 1: Incidencia de lesiones tumorales macroscópicas en tejidos de ratones con tumores de LMA C1498-Luc-mCherry.

Cuadro 1: Incidencia de lesiones tumorales macroscópicas en tejidos de ratones con tumores de LMA C1498-Luc-mCherry.

Estrategia de gating para citometría de flujo y muestreo de tejidos

Imagen 3: estrategia de gating para citometría de flujo para evaluar células de LMA mCherry+ C1498 en una muestra de ganglio linfático.
Cuadro 2: porcentaje de células de LMA C1498-Luc-mCherry+ en tejidos (n=1).

Imagen 3: estrategia de gating para citometría de flujo para evaluar células de LMA mCherry+ C1498 en una muestra de ganglio linfático.
Cuadro 2: porcentaje de células de LMA C1498-Luc-mCherry+ en tejidos (n=1).

Se están haciendo varios ensayos clínicos de inmunoterapias para LMA, entre ellos más de 15 ensayos con inhibidores de puntos de control anti-PD-1 o anti-PD-L1. Se ha reportado que la línea C1498 expresa bajos niveles de PD-L1 en cultivo celular, pero regula por incremento la expresión PD-L1 in vivo significativamente.1 La expresión de PD-L1 in vivo hace que el modelo sea sensible a un retraso en el crecimiento tumoral por bloqueo de PD-1. Esto está acompañado de un aumento significativo de la infiltración de células T CD4+ y CD8+ T en el hígado enfermo con LMA. Estos datos publicados sugieren que el C1498-luc-mCherry sería un modelo ideal para probar combinaciones de inmunoterapia con inhibidores de puntos de control.

Contact us to speak with one of our scientists to see how C1498-luc-mCherry or one of our other syngeneic models can be used for your next immuno-oncology study.


Referencias


1Zhang, T. F. Gajewski y J. Kline, Blood, (2009).

El cuidado y uso de animales se ejecutó de conformidad con las normativas de bienestar animal en un centro acreditado por la AAALAC con revisión y aprobación de protocolo del IACUC.

Conversemos

Contáctenos